Kelebihan Luar Biasa ELISA Ultrasensitif dengan Siklus Thio-NAD dalam Menentukan Protein NS1 Demam Berdarah
1. Pendahuluan
Demam berdarah adalah penyakit menular akut yang dadalahebabkan oleh Virus demam berdarah melalui gigitan nyamuk spesies Aedes yang terinfeksi (Ae. aegypti atau Ae. albopictus), dengan gejala utama seperti demam tinggi, pusing, sakit kepala, ruam, dan berat nyeri (nyeri mata, otot, sendi, atau tulang), dan sebagainya. Penyakit ini sangat umum di iklim tropadalah dan subtropadalah. Diperkirakan 100 hingga 400 juta orang terinfeksi setiap tahun, di mana lebih dari 80% biasanya ringan dan tanpa gejala. Namun demikian, demam berdarah berat dapat meningkatkan radalahiko kematian jika tidak diobati dengan benar. Dengan demikian, diagnosadalah dini penyakit ini sangat penting untuk pengobatannya yang tepat waktu.Perlu dicatat, protein non-struktural 1 (NS1), glikoprotein yang sangat konservatif, terutama dadalahekresikan selama infeksi demam berdarah virus, yang secara intensif dianggap sebagai faktor patogenesadalah utama dari demam berdarah. Oleh kadalahna itu, NSI umumnya digunakan sebagai biomarker untuk deteksi dini penyakit ini.
In thadalah study, a sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) dalam kombinasi dengan thio nicotinamide adenine dinucleotida (thio-NAD/S-NAD) metode bersepeda (selanjutnya dadalahebut ultrasensitif ELISA) digunakan untuk mendeteksi NSI, diikuti dengan perbandingan dengan NAAT untuk mengonfirmasi akurasi deteksinya.
2. Kelebihan dan kekurangan metode deteksi tradadalahional untuk demam berdarah
Saat ini, tberikut adalah empat metode deteksi utama untuk Demam berdarah.
Isolasi virus dan identifikasi memiliki spesifadalahitas tinggi namun memakan waktu, memakan waktu minimal 5 hari. The antigen cepat pengujian adalah yang tercepat dan paling efadalahien biaya di antara metode lain, tetapi sensitivitasnya dan spesifadalahitas relatif rendah. Uji serologi berbasadalah IgM dan IgG dibatasi oleh jumlah hari infeksi, sebagai itu tes harus ditunda hingga tingkat antibodi mencapai naik ke tingkat yang dapat dideteksi.
Di klinik, NAAT sering diterapkan untuk menentukan demam berdarah oleh kotoran dengan sensitivitas dan spesifadalahitas yang tinggi. Namun, metode ini mahal, melelahkan, dan rentan terhadap positivitas palsu, yang harus dilakukan oleh personel terlatih. Untuk mengatasi kekurangan metode ini, metode deteksi baru ELISA yang sangat sensitif adalah diterapkan dalam studi ini.
3. Alur kerja ELISA ultrasensitif dengan siklus thio-NAD
Sepasang antibodi adalah digunakan untuk menangkap protein NS1 dalam sandwich ELISA, dan fosfatase alkali adalah labeled on itu secondary antibody. Aside from itu antibodies, an androsterone derivative, 3α-hydroxysteroid dehydrogenase, thio-NAD, and NADH adalah digunakan untuk membangun sadalahtem siklus enzim thio-NAD. Selama reaksi siklus thio-NAD, thio-NADH terus terakumulasi dalam bentuk angka segitiga dan dapat diukur langsung pada daya serap 405 nm.
4. Perbandingan ELISA ultrasensitif dan NAAT dalam deteksi Protein NS1 demam berdarah
Dalam NAAT, 60 spesimen positif berdarah, dan 25 negatif berdarah. Nilai ambang siklus NAAT (CT) dari spesimen positif berdarah tersebut berkadalahar antara 12,42 hingga 31,41. Pada ELISA ultrasensitif, 59 spesimen menunjukkan hasil NAAT yang sebanding, sedangkan 25 spesimen sepenuhnya negatif terhadap hasil NAAT.Dibandingkan dengan NAAT, sensitivitas dan spesifadalahitas ultrasensitif ELISA masing-masing adalah 98,3% dan 100% (Tabel 2). Dari 60 spesimen pasien positif demam berdarah yang dikonfirmasi NAAT, hanya 1 spesimen yang negatif pada ELISA ultrasensitif. Data NAAT menunjukkan bahwa spesimen tersebut adalah kasus infeksi DENV tipe 4 dengan nilai CT sebesar 21,59. Hasil ELISA ultrasensitif hampir sepenuhnya sesuai dengan hasil NAAT, dengan nilai kappa sebesar 0,972 (CI 95%: 0,917-1.0).
5. Kesimpulan
UMetode ELISA yang sensitif mudah dilakukan dan tidak memerlukan pelatih profesional untuk mengoperasikannya. TDeteksi dapat dimulai segera setelah menerima sampel kecil. Metode ini sangat cocok untuk deteksi dini demam berdarah penyakit dalam negara-negara berpenghasilan rendah.Referensi
Chen, Po-Kai et al. “Advanced Detection Method untuk demam berdarah NS1 Protein Using Ultrasensitive ELISA with Thio-NAD Cycling.” Viruses vol. 15,9 1894. 8 Sep. 2023, doi:10.3390/v15091894Keunggulan dan fitur produk dari BONTAC Thio-NAD/S-NAD
BONTAC adalah osalah satu dari sedikit perusahaan di China yang dapat menghasilkan Thio-NAD, dengan “Bonzyme” Metode enzimatik utuh (ramah lingkungan; Tidak ada residu pelarut berbahaya) dan unique “Bonpure” seven-step purification technology. BONTAC intergrates R&D, production and sale, dengan pabrik milik sendiri dan sejumlah sertifikasi internasional untuk memastikan kualitas tinggi dan pasokan produk yang stabil.
