一种量化生物样本中NMN的科学方法

一种量化生物样本中NMN的科学方法



1. Pendahuluan

补充nikotinamida mononukleotida (NMN),以提升水平prekursor NAD teramidasinikotinamida adenin dinukleotida (NAD+)已被揭示是一种有前景的抗衰老干预措施。然而,仍然是一个严峻的挑战,即准确定量NAD+中间体, NMN 尤其是。本研究旨在介绍一种新方法,双同位素介导的LC-MS/MS方法(dimeLC-MS/MS),用于精确定量NMN 生物样本中的.

2. 影响NMN准确检测的因素

NMN难以被准确检测,因为它容易受到酶促降解、样本处理过程中的转化、在不同色谱柱和提取条件下的复杂行为,以及基质效应的影响。


具体来说,NMN具有高极性和低挥发性的特性,易溶于水但难溶于有机溶剂。这些特性极大地限制了多种常规定量分析方法的应用。

B生物样本seperti血液携带显著的CD38和CD73(外切-5'-核苷酸酶)活性,两者均可使用NMN作为底物。

NMN在色谱柱中的行为非常复杂,可能是因为其电荷的双重性质,因此提取和色谱柱条件的细微差异会显著影响NMN的可靠和准确检测。

3. dimeLC-MS/MS的应对策略dimeLC-MS/MS以减少影响因素的影响

为避免上述因素的干扰,采用了一种原型原型色谱柱NMN-2。该色谱柱含有,C18基高纯度硅胶颗粒,其比碳颗粒更能结合亲水性化合物,从而提高了分离能力。

高氯酸(PCA)被采用,因为它能高效地从血浆等生物样本中提取NAD+ 和NMN,且损失最小 .

为校正基质效应,sebanyak在PCA提取前,向 同位素化合物,在补充 NMN 的情况下生物样本中加入固定量(1 μM)的每种.

4. dimeLC-MS/MS的优势,dimeLC-MS/MS

D双同位素NMN标准品, NMN(M + 14)和NMN(M + 5),在LC-MS/MS驱动的方法中可以精确追踪NMN在样本处理过程中的命运,, yang显著提高了生物样本中NMN测量的准确性和可靠性。此外,dimeLC-MS/MS可以评估不同类型生物样本中NMN的提取效率和绝对浓度。

5. Kesimpulan

Artikel ini新的LC-MS/MS-驱动方法,采用双同位素NMN标准品, dapat能够准确且可靠地测量生物样本中的NMN。 mengukur NMN dalam sampel biologis. 它可用于未来关于NMN摄入的研究。

6. 参考文献

Unno, Junya et al. “Absolute quantification of nicotinamide mononucleotide in biological samples by double isotope-mediated liquid chromatography-tandem mass spectrometry (dimeLC-MS/MS).” npj aging vol. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1

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