Metode Ilmiah untuk Mengukur NMN dalam Sampel Biologis
1. Pendahuluan
Suplementasi nikotinamida mononukleotida (NMN) untuk meningkatkan regulasi tingkat nikotinamida adenin dinukleotida (NAD+) telah diungkapkan sebagai intervensi anti-penuaan yang menjanjikan. Namun, masih merupakan tantangan serius untuk mengukur zat antara NAD+ secara akurat, NMN khususnya. Studi ini didukung untuk memperkenalkan metode baru, metodologi LC-MS/MS yang dimediasi isotop ganda (dimeLC-MS/MS), untuk kuantifikasi yang tepat NMN dalam sampel biologis.
2. Faktor-faktor yang mempengaruhi deteksi NMN yang akurat
NMN sulit dideteksi secara akurat karena kerentanannya terhadap degradasi enzimatik, konversi dalam pemrosesan sampel, perilakunya yang kompleks dalam berbagai kolom dan kondisi ekstraksi, serta efek matriks.
Secara khusus, NMN memiliki sifat polaritas tinggi dan volatilitas rendah, yang mudah larut dalam air tetapi sulit larut dalam pelarut organik. Sifat-sifat ini sangat membatasi penerapan banyak metode analisis kuantitatif konvensional.
BSampel iologis misalnyadarah membawa aktivitas CD38 dan CD73 yang signifikan (ecto-5’-nukleotidase), keduanya dapat menggunakan NMN sebagai substrat.
Perilaku NMN dalam kolom sangat kompleks mungkin karena sifat bipartit muatannya sehingga perbedaan halus dalam kondisi ekstraksi dan kolom secara signifikan memengaruhi deteksi NMN yang andal dan akurat.
3. Strategi koping dimeLC-MS/MSuntuk mengurangi dampak faktor dampak
Untuk menghindari gangguan faktor-faktor yang disebutkan di atas, kolom prototipe NMN-2 diterapkan. Kolom ini mengandung partikel silika dengan kemurnian tinggi berbasis C18 yang lebih mampu mengikat senyawa hidrofilik daripada partikel karbon, meningkatkan kemampuan pemisahan.
Asam perklorat (PCA) digunakan karena dapat mengekstrak NAD+ dan NMN secara efisien dari sampel biologis seperti plasma dengan kerugian minimal.
Untuk menyesuaikan efek matriks, jumlah tetap (1 μM) dari setiap senyawa isotop ditambahkan ke sampel biologis sebelum ekstraksi PCA.
4. Keuntungansdari dimeLC-MS/MS
Standar NMN isotop ganda, NMN (M + 14) dan NMN (M + 5), dalam metodologi yang digerakkan oleh LC-MS/MS dapat secara tepat melacak nasib NMN selama pemrosesan sampel, yang secara signifikan meningkatkan akurasi dan keandalan pengukuran NMN dalam sampel biologis. Selain itu, dimeLC-MS/MS dapat mengevaluasi efisiensi ekstraksi dan konsentrasi absolut NMN dalam berbagai jenis sampel biologis.
5. Kesimpulan
ThsedangLC-MS/MS baru-metodologi yang digerakkan dengan standar NMN isotop ganda dapat mengukur NMN secara akurat dan andal dalam sampel biologis.Ini dapat digunakan untuk studi masa depan tentang asupan NMN.
6. Referensi
Unno, Junya dkk. "Kuantifikasi absolut nikotinamida mononukleotida dalam sampel biologis dengan kromatografi cair yang dimediasi isotop ganda-spektrometri massa tandem (dimeLC-MS/MS)." npj penuaan vol. 10,1 2. 2 Januari 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Mengapa memilih BONTAC?
BONTAC adalah pemimpin global NMN industri. Kami memiliki teknologi katalisis seluruh enzim pertama di Cina, dan telah menjadi perusahaan terkemuka dalam produk koenzim yang banyak digunakan dalam industri kesehatan, medis & kecantikan, pertanian hijau, biomedis dan bidang lainnya. Khususnya, BONTAC adalah NMN pemasok bahan baku tim David Sinclair terkenal di Universitas Harvard. Layanan dan produk kami dapat dipercaya. Selanjutnya BONTAC memiliki pusat penelitian teknologi rekayasa koenzim independen di tingkat provinsi di Cina dan pabrik milik sendiri, di mana kemurnian dan stabilitas produk dapat dipastikan.
Sanggahan
Thsedang artikel adalahberdasarkan referensi dijurnal akademik. Informasi yang relevan adalah Memberikan hanya untuk tujuan berbagi dan belajar, dan tidak mewakili tujuan saran medis apa pun. Jika ada pelanggaran, silakan kontakPenulis bagiHapusion. Pandangan yang diungkapkan dalam artikel ini tidak mewakili posisi BONTAC.